Associé au cryo-fixateur sous haute pression (EMPACT-2), l’automate de cryo-substitution remplace l’eau vitrifiée contenue dans le matériel biologique cryo-fixé par un solvant (éthanol ou acétone) à basse température avant l’inclusion dans la résine.
L’automate permet ensuite la polymérisation de la résine sous UV. L’automate peut également traiter du matériel biologique chimiquement fixé.
Déshydratation à basse température de spécimens biologiques congelés.
Déshydratation à basse température de spécimens biologiques fixés chimiquement.
Inclusion en résine d’échantillons déshydratés à basse température, à température ambiante ou à température plus élevée.
Polymérisation UV de la résine à basse température.
Déshydratation conventionnelle de spécimens biologiques, inclusion et polymérisation de la résine à chaud.
Le microtome automatique à lame vibrante (vibratome) est conçu pour couper les spécimens biologiques, fixés ou non fixés (> 30µm).
Il permet aux utilisateurs de sélectionner manuellement l’épaisseur des sections. De plus, la déviation verticale peut être mesurée et atténuée en utilisant le dispositif « vibrocheck ». Cette correction favorise la préservation de l’intégrité anatomique et physiologique des spécimens délicats lors de la coupe.
Grâce au « minichiller », il est possible de maintenir une température froide et constante lors de la coupe.
Le Q150T E est un système compact qui permet d’appliquer un revêtement de carbone afin d’augmenter la stabilité et l’adhérence du spécimen sur les grilles avant l’observation au microscope électronique. Cet appareil de nouvelle génération produit des revêtements de carbone très stables et reproductibles.
Revêtement en carbone sous vide des grilles, idéal pour la microscopie électronique à transmission.
Appareil simple d’utilisation.
Contrôle précis du profil de l’évaporation garantissant une épaisseur de film de carbone constante et reproductible.
Commandes entièrement automatisées avec écran tactile.
Système de reconnaissance « intelligente », détection automatique du type de revêtement utilisé.
Système polyvalent pouvant effectuer des revêtements de différentes natures (fibre de carbone et autres métaux).
Le Vitrobot est un appareil utilisé pour la vitrification d’échantillons en suspension et est entièrement automatisé afin de répondre aux exigences de la science moderne. Il empêche la formation de cristaux de glace et limite ainsi la présence d’artéfacts qui sont en quantité importante avec les autres méthodes de congélation.
Le transfert des grilles à partir du milieu de vitrification vers la boîte d’entreposage est semi-automatisé, ce qui assure des résultats reproductibles et un excellent rendement.
Résultats reproductibles lors de la vitrification d’échantillons en suspension.
Possibilité de vitrifier rapidement plusieurs échantillons.
Contrôle facile de l’appareil, grande polyvalence.
Vitrification de haute qualité dans un environnement entièrement contrôlé (température, nombre de « blottings », pression sur le papier buvard, temps de drainage, etc.).
Transfert sur grille semi-automatisé.
Il est également possible de conserver au CENTRE DE NEUROPHOTONIQUE les grilles dans l’azote liquide grâce à un système d’entreposage.
Compagnie: Leica Microsystems Modèle: EM PACT2 and EM RTS
Grâce à la cryo-fixation rapide du spécimen (en moins de 5 secondes), l’eau contenue dans le matériel biologique est vitrifiée, prévenant ainsi la formation de cristaux de glace pouvant endommager le contenu cellulaire.
Le EMPACT2 permet de préparer des échantillons biologiques aqueux (d’épaisseur maximale de 200µm) près de l’état natif.
La cryo-fixation offre également un avantage dans la réalisation des marquages immunohistochimiques en post-enrobage en préservant les épitopes antigéniques pouvant parfois être détruits par une fixation chimique.
Un système de microbiopsie est disponible pour le prélèvement de tissu et le transfert rapide des échantillons vers l’EMPACT2-EM RTS.
Un système de disques de saphir est disponible pour la culture cellulaire. Les cellules peuvent être préalablement sélectionnées en microscopie optique pour ensuite être rapidement congelées avec l’EMPACT2- EM RTS.
Il est possible d’associer l’EMPACT2- EM RTS à l’automate de cryo-substitution Leica AFS ou encore de couper les échantillons congelés grâce à l’ultramicrotome UC7 et sa chambre de congélation FC7.
Compagnie: Leica Microsystems Modèle: Leica Ultracut EM UCT Leica Ultracut EM UC7 Chambre à basse température: Leica EM FC
La coupe à l’ultramicrotome des spécimens biologiques est une étape préalable essentielle afin de produire des sections semi et ultra-fines (40-200 nm d’épaisseur). Ces sections peuvent ensuite être observées en microscopie électronique.
Leica Ultracut UCT
La plateforme offre la coupe de spécimens de même qu’une formation aux utilisateurs qui désirent effectuer eux-mêmes la préparation de leurs échantillons.
Le microscope électronique à transmission permet d’étudier en détail les caractéristiques ultrastructurales des spécimens biologiques. Cet appareil permet également de caractériser de façon précise la localisation cellulaire et subcellulaire de molécules spécifiques.
Une formation est disponible pour les utilisateurs qui désirent effectuer eux-mêmes l’observation de leurs échantillons biologiques.
Microscopie électronique à transmission, Tecnai 12, 120kV
Compagnie: Philips Modèle: Tecnai 12, 120 kV Grossissement: 19.5 X à 300 000 X Logiciel d’acquisition : Tecnai UI version 2.1.8, FEI company Logiciel d’analyse: AnalySIS version 3.2, Soft Imaging System GmbH Digital Caméra digitale: Mega View I
Une formation personnalisée doit obligatoirement être suivie afin d’être autorisé à utiliser un appareil de la plateforme de microscopie électronique. Ces formations sont personnalisées afin de mieux répondre aux besoins de chaque utilisateur.
Vous pouvez également vous inscrire à un cours complet sur la microscopie électronique (1 crédit) disponible à l’Université Laval (NRB-8001 Microscopie électronique : théorie et pratique).
Réservation d’Équipments
Seules les personnes ayant reçu une formation sont autorisées à réserver un appareil de la plateforme de microscopie électronique. Les membres du CENTRE DE NEUROPHOTONIQUE ont priorité sur les utilisateurs externes.
La plateforme de microscopie électronique du Centre de neurophotonique a pour objectif de répondre aux besoins grandissants des études morphologiques nécessitant la localisation ultrastructurale précise d’éléments cellulaires et subcellulaires.
Elle offre des outils techniques, méthodologiques et informatiques à la fine pointe de la technologie qui accompagnent l’utilisation d’un microscope électronique à transmission. Des techniques avant-gardistes telles que la cryo-fixation sous haute pression, permettent une préservation optimale du matériel biologique et l’observation de ses caractéristiques ultrastructurales fines.
Le service offre la préparation et l’enrobage du matériel biologique ainsi que la coupe semi- et ultrafine des échantillons à l’ultramicrotome. Une formation adéquate et personnalisée pour chaque appareil est également disponible.
Martin Parent, Ph.D Institut universitaire en santé mentale de Québec 2601, chemin de la Canardière, F-6500 Québec (Québec), G1J 2G3 Tél.:(418) 663-5747 E-mail:martin.parent@cervo.ulaval.ca
